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哈獸研成功分離我國第一個ASFV毒株（Pig/HLJ/18）
發布時間：
2019-03-25
來源：
哈獸研
我國發生非洲豬瘟(ASF)疫情後，中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所國家非洲豬瘟專業實驗室按照農業農村部及中國農業科學院黨組工作部署，依托國家動物疫病防控高級别生物安全實驗室，緊急組織ASF科技攻關。目前，已在非洲豬瘟病毒(ASFV)病原生物學和分子流行病學方面取得系列進展。該實驗室成功分離了我國第一株ASFV，對其感染性、緻病力和傳播能力等生物學特性進行了較為系統的研究，并建立了動物感染模型; 初步闡明了我國ASFV流行毒株的基因組特點和進化關系，為我國ASF疫情的有效防控提供了重要科學依據，為檢測技術和防治疫苗研發奠定了重要基礎。相關研究結果先後發表在新發傳染病專業期刊《Emerging Microbes and Infections》。
論文作者趙東明、劉任強等人利用2018年9月3日黑龍江省佳木斯疫情發病豬樣品，接種豬原代肺泡巨噬細胞，成功分離出我國第一個ASFV毒株(Pig/HLJ/18)。分别采用紅細胞吸附試驗、免疫印迹試驗、間接免疫熒光及電鏡觀察等試驗系統鑒定了分離病毒株;Pig/HLJ/18在豬原代巨噬細胞顯示良好複制能力，病毒滴度可達108HAD50/ml以上。SPF豬肌注接種不同劑量Pig/HLJ/18後，2-3天血液病毒核酸檢測陽性，3-4天出現發熱等症狀，4-5天口腔及肛拭子樣品病毒核酸檢測陽性，6-10天内接種豬全部發病死亡;病死豬剖檢一般表現為急性出血性變化，部分脾髒極度腫大，難以與其他急性出血性疾病區别。研究中未接種病毒的同居接觸豬同樣全部發病、死亡，與接種感染豬相比，同居感染豬病毒血症、發病、排毒及死亡時間均延後5-8天不等。所有發病死亡豬體内均可檢測到高水平ASFV載量，發病後期血液病毒滴度可達108 HAD50/ml以上，病死豬脾髒、淋巴結、肝、腎等器官組織病毒滴度介于105-108 HAD50/ml。依據測定Pig/HLJ/18毒株對豬半數緻死劑量(PLD50)結果，病死豬每毫升血液所含PLD50病毒量達100萬以上，每克組織所含PLD50病毒量達10萬以上。以上研究結果證明，我國ASFV流行病毒株感染豬能引起高度急性病程，具有高度的緻病性和傳染性。該研究内容于2019年3月22日在線發表在《EmergingMicrobes and Infections》(http://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/22221751.2019.1590128)。
此外，國家非洲豬瘟專業實驗室還完成了Pig/HLJ/18完整基因組及來自遼甯省某飼料加工企業豬血粉樣品中污染ASFV完整基因組序列分析，獲得了可靠的全基因組序列信息。分析發現，引起黑龍江佳木斯疫情的Pig/HLJ/18株與同時期遼甯豬血粉中污染的ASFV(DB/SY/18株)基因組序列完全一緻，與2017年波蘭分離株(PoL/2017)高度相似， 但與2007年的格魯吉亞分離株(GA/2007)存在插入、缺失及突變等差異。該研究同時提示， 規範的豬血粉生産工藝流程可以殺滅污染的ASFV，利用該血粉污染樣品連續飼喂SPF豬3周以上雖未導緻豬感染發病， 但豬血粉作為飼料成分存在傳播ASFV的巨大風險，應予以高度重視。有關結果已于2019年2月27日在《Emerging Microbes and Infections》發表(http://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/22221751.2019.1565915)。
以上研究得到了黑龍江省委省政府及有關部門的大力支持。
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